High Performance Liquid Chromatography

Cuplajul cu spectrometria de masa a transformat, in ultimul timp, aceasta metoda in principalul mijloc de analiza a compusilor moleculari naturali sau sintetici, constituind unul din pilonii pe care se sprijina chimia sintetica actuala si pe care s-a dezvoltat biochimia si biotehnologia moderna.

Metoda constituie o evolutie a unei metode mai vechi, cromatografia pe coloana clasica, care servea in primul rand la izolarea preparativa a compusilor naturali.Prin introducerea pompelor si in consecinta, lucrandu-se la presiuni tot mai ridicate (200 atm), dezvoltarea unor faze stationare performante, de dimensiuni tot mai mici (recent constituite din granule de faze stationare sferice, cu diametre 2 - 5 A"m), in coloane tot mai scurte (3 -10 cm) s-a ajuns, incepand cu anul 1969, la configuratia actuala.

Pompa este considerata una dintre cele mai importante componente ale HPLC deoarece permite realizarea unui debit constant al eluentului prin intreg sistemul: injector, coloana, detector marind deosebit de mult viteza separarii.

Intr-un cromatograf de lichide pot exista una sau mai multe pompe, fiecare furnizand o presiune care poate atinge 20.000 kPa (cca. 200 atm). Presiunea deosebita este necesara deoarece coloana are o umplutura de finete mare si, in lipsa presiunii, debitul ar fi nepractic de mic.